3-8-1- روش کار 24
3-9- سنتز رشته اول cDNA.. 26
3-10- واكنش RT-PCRبرای ژنهای AlHA1و مرجع.. 26
3-11- تهیه ژل آگارز. 27
3-12- بافر( X50) TAE.. 28
3-12-1- محلول Tris 28
3-12-2- محلول اتیلن دی آمین تترا استیک اسید (EDTA) 28
3-13- همسانه‌سازی قطعه مورد نظر در پلاسمید. 29
3-13-1- اتصال قطعه مورد نظر به درون ناقل پلاسمیدی.. 29
3-13-2- انتقال پلاسمید نوترکیب به باکتری E. coli سویه DH5α. 30
3-13-3- انتخاب همسانه‌ها 31
3-13-4- کشت شبانه‌ی کلنی‌های مثبت.. 32
3-13-5- استخراج پلاسمید نوترکیب از باکتری به روش لیز کردن آلکالاینی.. 32
3-13-6- هضم آنزیمی پلاسمیدهای نوترکیب.. 35
3-14- آنالیزهای آماری.. 36
فصل چهارم
نتایج و بحث… 37
4-1- آنالیز صفات مورفولوژیک… 37
4-1-1- وزن ریشه. 37
4-1-2-وزن ساقه. 39
4-1-3- وزن کل گیاه 40
4-1-4-طول ریشه. 41
4-1-5- طول ساقه. 41
4-1-6-طول کل گیاه 42
4-2- اندازه‌گیری عناصر در گیاه. 43
4-2-1- جیوه 44
4-2-2- سرب.. 44
4-2-3- نقره 45
4-3- کمیت و کیفیت دی‌ان‌ا استخراج شده. 46
4-4- استخراج RNA از برگ گیاه A. littoralis. 46
4-5 – واکنش زنجیره‌ای پلیمراز PCR 47
4-6- بررسی بیان ژن Alha1 تحت تنش فلزات سنگین و شوری به روش نیمه کمی.. 48
4-6-1- بررسی اثر سطوح مختلف سرب در زمان‌های مختلف پس از اعمال تیمار بر بیان ژن Alha1 49
4-6-2- بررسی اثر سطوح مختلف نقره در زمان‌های مختلف پس از اعمال تیمار بر بیان ژن Alha1 50
4-6-3- بررسی اثر سطوح مختلف کلرید سدیم در زمان‌های مختلف پس از اعمال تیمار بر بیان ژن Alha1 52
این مطلب را هم بخوانید :
4-6-4- بررسی اثر سطوح مختلف جیوه در زمان‌های مختلف پس از اعمال تیمار بر بیان ژن Alha1 53
4-7- همسانه‌سازی محصول پیسیآر. 56
4-8 – نتیجه گیری.. 57
4-9- پیشنهادات.. 58
مقدمه
1-1- تنش
در محیطهای طبیعی و شرایط زراعی، گیاهان به دفعات در معرض تنشهای محیطی قرار میگیرند. تنش معمولاً به عنوان یک عامل خارجی که باعث تأثیر منفی بر زندگی گیاه میشود تعریف میشود. مفهوم واژه تنش همواره با تحمل تنش همراه است که قابلیت گیاه در رو به رو شدن با شرایط نامساعد محیطی است. تطابق و سازگاری به تنشهای محیطی ناشی از تغییرات در سطوح مختلف اندامهای موجود زنده از سطح آناتومیک و مورفولوژیک تا سطوح سلولی، بیوشیمیایی و مولکولی رخ میدهد. واکنشهای سلولی به تنش شامل تغییر در چرخه سلولی و تقسیم سلولی، تغییر در سیستم غشاهای داخلی و واکوئلی سلول و تغییر در ساختار دیواره سلولی است که در تمام این پاسخها شاهد تغییر الگوی بیان ژن یا ژنهایی هستیم است که محصول آنها در تنش مؤثر هستند (Taiz and Zeiger, 1991).
